藥學(xué)論文的開題報(bào)告
研究意義:
1、D-半乳糖致衰老神經(jīng)細(xì)胞模型鮮見報(bào)道，明確該模型作用機(jī)制有助于利用此模型進(jìn)行抗衰老藥物的篩選和機(jī)理研究。
2、梓醇在衰老動(dòng)物模型上的效果明顯，利用細(xì)胞模型的研究有助于闡明梓醇抗衰老作用的`分子作用機(jī)制。
研究內(nèi)容:
采用小鼠腦神經(jīng)元細(xì)胞原代培養(yǎng),以D-半乳糖誘導(dǎo)體外神經(jīng)元細(xì)胞衰老,并通過研究藥物梓醇的加入對(duì)神經(jīng)元細(xì)胞的作用,進(jìn)行細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察、細(xì)胞活力、細(xì)胞凋亡等綜合指標(biāo)的測(cè)定。
實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)用細(xì)胞免疫組化染色和熒光染色技術(shù)、流式細(xì)胞儀、熒光顯微鏡、紫外分光光度計(jì)、熒光酶標(biāo)儀等方法手段，研究梓醇在體外的神經(jīng)保護(hù)作用機(jī)制。
預(yù)期達(dá)到的成果和水平:梓醇對(duì)D-半乳糖引起的小鼠腦神經(jīng)元細(xì)胞衰老有保護(hù)作用.
因此本課題擬利用原代培養(yǎng)SD大鼠乳鼠腦皮層神經(jīng)細(xì)胞，從超微結(jié)構(gòu)、細(xì)胞周期分析及SA-β-半乳糖苷酶(Senescence associated β-galactosidase)化學(xué)染色等指標(biāo)觀察D-半乳糖培養(yǎng)對(duì)神經(jīng)元擬老化反應(yīng)并從生化方面研究梓醇的抗老化作用。
研究重點(diǎn)難點(diǎn):
1、掌握原代神經(jīng)元細(xì)胞的培養(yǎng)、免疫組織化學(xué)等實(shí)驗(yàn)技術(shù)。
2、明確D-半乳糖致神經(jīng)元衰老的作用濃度和作用時(shí)間范圍。
3、初步研究D-半乳糖致神經(jīng)元衰老的作用機(jī)理。
4、明確梓醇對(duì)D-半乳糖致衰老神經(jīng)元的作用效果。
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